选择性培养基
选择性培养基(selectedmedium) 选择性培养基就是根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基,其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选效率。这种培养基是在上世纪末由荷兰的M.
W.Beijerinck和俄国的S.N.Vinogradsky发明的。我国劳动人民在12世纪(宋代)时,已根据红曲霉有耐酸和耐高温的特性,采用了明矾来调节酸度和用酸米来抑制杂菌的方法,培养出纯度很高的红曲,这实际上就是一种选择性培养基。
混合样品中数量很少的某种微生物,如直接采用平板划线或稀释法进行分离,必难以奏效。这时,第一种办法可利用该分离对象对某一营养物质有一“嗜好”的原理,专门在培养基中加入该营养物,从而使它成为一种加富培养基(enrichedmedium)。
采用这类“投其所好”的策略即可使该微生物大大增殖,在数量上超过原有占优势的微生物,以达到富集培养的目的。第二种办法则可利用该分离对象对某种制菌物质的抗性,在混合培养物中加入该抑制物质,经培养后,由于原来占优势的它种微生物的生长受到抑制,而分离对象却可趁机大大增殖,使之在数量上占据优势。通过这种“取其所抗”的办法,也可达到富集培养的目的。
用于加富的营养物主要是一些特殊的碳源和氮源,如纤维素可被用来富集纤维素分解微生物,甘露醇用来富集自生固氮菌,石蜡油用来富集分解石油的微生物,以及用较浓的糖液来富集酵母菌,等等。
用于抑制它种微生物的选择性抑制剂有染料(结晶紫等)、抗生素和脱氧胆酸钠等(见表5-19);有利于选择培养的理化因素有温度、氧气、pH或渗透压等。
常用的选择性培养基几乎都同时利用了以上的“投其所好”和“取其所抗”两种原理。具体例子如:
(1)酵母富集培养基 葡萄糖5%,尿素0.1%,(NH4)2SO4 0.1%,KH2PO4 0.25%,Na2HPO4 0.05%,MgSO4·7H2O 0.1%,FeSO4·7H2O 0.01%,酵母膏0.05%,孟加拉红1/3万,pH=4.5
(2)Ashby无氮培养基(富集自生固氮菌用)甘露醇1%,KH2PO4 0.02%,MgSO4·7H2O 0.02%,NaCl 0.02%,CaSO4·2H2O 0.01%,CaCO3 0.5%
(3)Martin培养基(富集土壤真菌用)葡萄糖1%,蛋白胨0.5%,KH2PO4 0.1%,MgSO4·7H2O 0.05%,琼脂2%,孟加拉红1/3万,链霉素30μg/ml,金霉素2μg/ml
