原料药清洁验证指南

允许残留限度(Mper)是一个计算出的数值,代表设备清洁程度的质量标准限度(参见4.0部分,可接受限度),但是,对清洁后设备中残留物(M)实际数量的检测必须使用适当的方法来获得,即,针对取样方法和样品中污染物的定量。

由于对设备可接受清洁度的决定会对产品质量有潜在风险,因此用于M检测的方法必须进行验证,必须至少验证方法的专属性、灵敏度和回收率。 8.2 Validation Requirements 验证要求 8.2.1 General 通则

分析方法验证的要求在ICH Q2(R1)―分析方法验证:检验和方法学,2005年11月‖中已给出。其中列出了四种不同类型的分析方法,各适用不同的验证要求,它们分别是:鉴别测试、杂质检验(定量和限度测试)和含量测试。每种类型方法的验证要求在表1中列出。

在上述的分析方法中必须考虑该清单,但是,要根据各案处理例外情况。要注意耐用性在表中并未列出,但在方法的研发过程中适当阶段需要进行考虑。

在实际应用中,通常可以设计一个试验性工作,使得在方法设计时可以同步考虑方法的验证特性,例如,专属性、线性、范围、准确度和精密度。

分析方法验证必须符合预定的可接受限度。可接受限度应记录在书面的通用方针或验证中。但是,对每个验证过的方法必须有一个验证报告,总结验证结果。

表1 方法验证需求清单

分析方法类型 特性 鉴别 定量测试 准确度 精密度 重复性 中间精密度 专属性2 检测限 定量限 — — — — 1 —3 限度测试 — — — — — 杂质检测 含量

线性 范围 — — — — — 表示该特性一般不需要评估。 表示该特性一般要进行评估。 说明 1 如果做了重复性测试,则不需要做中间精密度。 2 如果一个方法缺乏专属性,则可以用另一个支持性分析方法进行补偿。 3 有时需要。 在清洁验证专用分析方法验证中,一般应用―杂质检测‖的要求。

有时可以应用―杂质定量检测‖要求,例如,如果一个方法适用于几个可能的可接受限度,因此可能需要对一定水平范围内的残留物进行定量检测,例如,残留物M的测得量必须与可接受标准5-750g/设备相比较。如果方法要用于几个产品更换情况下的检测,则可以使用上述方法。

有时可以应用―杂质限度检测‖要求,例如,如果方法需要符合一个特定的可接受限度,例如,对M的测量必须与Mper ≤ 105 g/设备进行比较。

8.2.2 Analytical Method Validation for Cleaning Validation 清洁验证所用分析方法验证 在以下部分强调了清洁验证专用的分析方法要点。更详细的要求参见ICH Q2(R1)。

专属性是所有分析方法(见表1)都适用的基本要求,但是,在清洁验证中,可能并不是所有潜在杂质都能被明确,在这种情况下要重点注意即使是专属的方法,也并不一定能检测出所有杂质。可以研究未知杂质的特性,建立适当的检验方法并验证,但这样做所耗费的时间可能是无法接受的。

这时,可能会适当的办法是采用一个能检出所有潜在杂质的方法,即使该方法对有些杂质不具有专属性。例如,如果只有不挥发性杂质产生,只要验证结果符合表1的要求,可以使用非专属性方法蒸发残渣来检测所有不挥发性杂质的总和。

考虑到要使设备清洁程度可以接受,必须假定蒸发残渣结果中会包括最差情形的杂质(毒性最强、活性最强等)。有时,可以联合使用几个方法来达到必需的专属性要求。

在清洁验证完成后,可以使用非专属性方法(例如,蒸发残渣)对按验证过的清洁程序清洁后的设备进行日常检测,只要该方法适合其既定用途。可能的情况下,清洁验证所用检验方法对杂质检测的灵敏度应与取样方法和分析方法一起测试(参见7.2.4部分)。

8.2.3 Detection and Quantitation Limits 定量限和检测限

低于定量限(LOQ)应报告为定量限值(最差情况法)。例如,如果LOQ为10mg/L,测得空白结果为7mg/L,测得残留值为3mg/L,则该样品的残留值应报告为LOQ,即10mg/L。

一般可以假定,在杂质定量检测时,LOQ应为质量标准的约0.5倍,即对于清洁验证来说,可接受限度的0.5或更低。LOD不得高于可接受限度。在以下部分,列出了三种确定LOQ/LOD的方法: ? Based on Visual Evaluation 目视评估

目视评估可以用于非仪器方法,但也可用于仪器分析方法。这种方法经常用于TLC。 ? Based on Signal-to-Noise Approach 信噪比方法

本方法只能用于产生基线噪声的分析方法(例如,GC、HPLC)。信噪比(S/N)为2-3:1时,一般可以作为估计的检测限(LOD),10:1可以作为定量限(LOQ)。信噪比值可以根据公式1和图1计算:

其中:H为基线平均值的峰高

hn是基线在5-20部半峰高时峰宽范围内最大偏差

? Based on the Standard Deviation of the Response and the Slope 根据响应和斜率的标准偏差

T检查限可以采用公式2表示,定量限可以用公式3表示。

8.2.4 Determination of Recovery 回收率测定

可能的话,可以针对取样方法和检验方法同时进行清洁验证中杂质检测的回收率和灵敏度(定量限-LOQ,或检测限-LOD)。例如,可以采用与设备表面材质相同的表面材料(例如,材质、粗糙度),在上面加不同已知数量的杂质,然后采用与清洁验证研究相同的方法取样并分析。

再将使用该方法所得的总体结果与ICH Q2(R1)中定义的检测限或定量限标准进行比较。可对接近限度的已知样品进行分析来验证分析方法的检测限和定量限。

将检测结果与实际数量进行比较,用于表面残留计算。回收率一般是在准确性测试中确定,应报告为已知杂质数量的百分比。

例如在杂质定量测试中,回收率≥ 90 %时一般认为是可以接受的。在清洁验证中,如果回收率≥ 90 %,在M残留量真值计算中可以不需要考虑回收率;如果回收率

公式4:

其中M:清洁后设备上残留物的数量真值 Mres:测得残留量(取样后分析测量)

R:回收率除以100(例如,对于75%即为75/100=0.75)

8.2.5 Validation Requirements for Quantitative Testing of Impurities 杂质定量测试的验证要求

根据ICH Q2(R1),杂质定量检测方法的验证要求在表2中列出,包括制订的可接受标准(只是举例)。可以根据科学合理的原则制订适当的可接受标准。

重点要注意的是,在清洁验证研究中,定量检测方法验证应满足所有要求。如果分析方法将用于设备中残留量有不同的几个质量标准,则一般采用杂质定量方法验证要求。

最低预期可接受限度,在表2中称为MperMin,和最高限度,称为MperMax。对于只有一个特定的可接受限度,一般可以使用杂质限度测试方法,对方法只要做相应的验证即可。如果要将杂质定量方法的验证用于单一可接受限度,则MperMin = MperMax = Mper。

表2中试验里,可以采用杂质(如果可以获得标准品的话)加入样品中至适当的浓度水平,或与另一个经过确认的检验方法进行对比(如果不能得到标准品的话),以得到被分析物的真实浓度值。

表2 验证要求 测试项目 准确度 在指定的浓度范围内对3个浓度进行至少9次检测(例如,3个浓度各按完整的分析方法检测3次)。测试残留物在样品中的总量(例如重量/重量)。 报告: □ 精密度,表达为回收率百分比或 □ 平均值与所接受的真值之间的差异.

□ 置信区间 精密度: 使用均匀的具有标准值的样品或(如果没有标准样品的话)人为制备的样品,在指定范围内采用指定方法(例如,3个浓度各3次重复检测)检测至少9次,或在检测浓度100%水平测试至少6次。

重复性(含量精密度) 建立相同操作条件下较短时间内的精密度 报告:: □ 标准偏差(与S相互依存) □ 整个方法浓度范围内的总体相对标准偏差 □ 一个浓度水平的相对标准偏差 参见 S ≤10.00% ≤20.00% 90.00-110.00% ≤10.00% (P=95%) 可能的可接受标准